無(wú)菌檢測法：用于檢查藥典要求無(wú)菌的藥品、生物制品、醫療器械、原料、輔料、及其他品種是否無(wú)菌的一種方法。

無(wú)菌檢查的目的：

A 將供試品或其浸提液接種于培養基內，以檢驗供試品是否有微生物污染。（比較小的樣品直接接種，大的浸提液）

B 無(wú)菌檢查法分為直接接種法和薄膜過(guò)濾法

無(wú)菌檢查的步驟：

環(huán)境及人員要求：

無(wú)菌檢查應在無(wú)菌條件下進(jìn)行，試驗環(huán)境必須達到無(wú)菌檢驗的要求，單向流空氣區、工作臺面及環(huán)境應定期按《醫藥工業(yè)潔凈室（區）懸浮粒子、浮游菌和沉降菌的測試方法》的現行國家標準進(jìn)行潔凈度確認。日常檢驗還需對試驗環(huán)境進(jìn)行監控。

9203藥品微生物實(shí)驗室質(zhì)量管理指導原則-2020年版《中國藥典》

微生物實(shí)驗的各項工作應在專(zhuān)屬的區域進(jìn)行，以降低交叉污染、假陽(yáng)性結果和假陰性結果出現的風(fēng)險。無(wú)菌檢查應在隔離器系統或B級背景下的*單向流潔凈區域中進(jìn)行，微生物限度檢查應在不低于D級背景下的生物安全柜或B級潔凈區域內進(jìn)行。*和B級區域的空氣供給應通過(guò)終端高效空氣過(guò)濾器(HEPA)

9205 藥品潔凈實(shí)驗室微生物監測和控制指導原則-2020年版《中國藥典》

按空氣懸浮粒子大小的數量和不同參考現行“藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規范”分為A、B、C、D 4個(gè)級別。

實(shí)驗人員上崗前應依據所在崗位和職責接受相應的培訓，在確認他們可以承擔某一試驗前，他們不能獨立從事該項微生物試驗。培訓內容包括勝任工作所必需的設備操作、微生物檢驗技術(shù)等方面的培訓，如無(wú)菌操作、培養基制備、消毒、滅菌、注平板、菌落計數、菌種的轉種、傳代和保藏、潔凈區域的微生物檢測、微生物檢查方法和鑒定基本技術(shù)等，經(jīng)考核合格后方可上崗。

實(shí)驗人員應經(jīng)過(guò)實(shí)驗室生物安全方面的培訓，熟悉生物安全操作知識和消毒滅 菌知識，保證自身安全，防止微生物在實(shí)驗室內部污染（陽(yáng)性培養物滅菌處理）。實(shí)驗室應確定實(shí)驗人員持續培訓的需求，制定繼續教育計劃，保證知識與技能不斷的更新。

所需設備：

培養基適用性檢查

硫乙醇酸鹽流體培養基（FTM）：主要用于厭氧菌的培養，也可用于需氧菌的培養；

胰酪大豆胨液體培養基（TSB）：用于真菌和需氧菌的培養。

配制：可按藥典中的處方制備培養基，亦可使用按該處方生產(chǎn)的符合規定的脫水培養基或商品化的預制培養基

• 制備好的培養基若不即時(shí)使用，應置于無(wú)菌密閉容器中，在2℃~25℃、避光的環(huán)境下保存，并在經(jīng)驗證的保存內使用。

無(wú)菌檢查用的硫乙醇酸鹽流體培養基及胰酪大豆胨液體培養基等應符合培養基的無(wú)菌性檢查及靈敏度檢查的要求。

無(wú)菌性檢查

每批培養基隨機不少于5支（瓶），置各培養基規定的溫度培養14天，應無(wú)菌生長(cháng)。

進(jìn)行產(chǎn)品無(wú)菌檢查時(shí)，應進(jìn)行方法適用性試驗，以確認所采用的方法適合于該產(chǎn)品的無(wú)菌檢查。若檢驗程序或產(chǎn)品發(fā)生變化可能影響檢驗結果時(shí)，應重新進(jìn)行方法適用性試驗?？膳c供試品的無(wú)菌檢查同時(shí)進(jìn)行。

方法適用性試驗按“供試品的無(wú)菌檢查”的規定及下列要求進(jìn)行操作。對每一試驗菌應逐一進(jìn)行方法確認。

無(wú)菌檢查法包括薄膜過(guò)濾法和直接接種法。